輪狀病毒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)試劑盒

Rota virus enzymes linked immunosorbent assay reagent kit

主要性狀

Rota-Elisa試劑盒是用于檢測(cè)人和動(dòng)物糞便中輪狀病毒的，僅作分群用。Rota-Elisa試劑盒保存于2-8℃，效期暫定為半年。

基本原理

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)也稱酶標(biāo)記法，是酶免疫分析法的一種。如果酶免疫分析在固相中進(jìn)行，稱為固相酶免疫分析；在液相中進(jìn)行，稱為液相酶免疫分析。本試劑盒屬固相酶免疫分析之一?；驹硎菍⒖扇苄钥乖ɑ蚩贵w）吸附在固相載體上，使免疫反應(yīng)在固相支持物上進(jìn)行。再結(jié)合酶標(biāo)記抗體（或抗原），利用檢測(cè)酶分解底物的量的差異來(lái)定量檢測(cè)相應(yīng)的抗原（或抗體）。此法的基本要求是：1.抗原或抗體能牢固吸附于固相載體的表面且保持其免疫活性；2.抗原或抗體與酶連接所形成的結(jié)合物應(yīng)既有免疫學(xué)特異性又具有酶活性；3.底物被酶分解，形成可溶性穩(wěn)定的有色產(chǎn)物。測(cè)定抗體時(shí)，將抗原吸附到固相載體上，然后與檢測(cè)樣品中的抗體反應(yīng)，在固相載體上形成抗原抗體復(fù)合物，再與酶標(biāo)記的抗體（抗免疫球蛋白）反應(yīng)，檢測(cè)樣品中與抗原結(jié)合的抗體，底物被酶分解，出現(xiàn)顏色反應(yīng)，其顯色的深淺與樣品中相應(yīng)抗體量成正比。測(cè)定抗原時(shí)，先將特異性抗體吸附于固相載體，加入待檢抗原后，再用酶標(biāo)記的抗體（與吸附在固相載體上的抗體相同）檢測(cè)樣品中的抗原，加入底物所出現(xiàn)的顏色改變與待測(cè)的抗原量成正比。

Rota-Elisa試劑盒采用直接法elisa，其簡(jiǎn)單流程如下：

1、輪狀病毒IgG（抗體）包被，洗。

2、加待檢糞樣（抗原），洗。

3、加輪狀病毒IgG-酶結(jié)合物，洗。

4、加底物。

5、終止反應(yīng)，判定結(jié)果。

結(jié)果判定

準(zhǔn)確的判斷應(yīng)使用分光光度計(jì)，光密度值越大，則陽(yáng)性反應(yīng)越強(qiáng)。待檢標(biāo)本的判定以P/N比值計(jì)算：

P/N=（待檢標(biāo)本光密度值-空白底物對(duì)照光密度值） / （陰性標(biāo)本對(duì)照光密度值-空白底物對(duì)照光密度值）

P/N比值大于3.0，待檢標(biāo)本為陽(yáng)性；P/N比值為2.0-3.0，待檢標(biāo)本為可疑；P/N比值小于2.0，待檢標(biāo)本為陰性。