輪狀病毒酶聯(lián)免疫吸附試驗試劑盒
Rota virus enzymes linked immunosorbent assay reagent kit
主要性狀
Rota-Elisa試劑盒是用于檢測人和動物糞便中輪狀病毒的,僅作分群用。Rota-Elisa試劑盒保存于2-8℃,效期暫定為半年。
基本原理
酶聯(lián)免疫吸附試驗也稱酶標記法,是酶免疫分析法的一種。如果酶免疫分析在固相中進行,稱為固相酶免疫分析;在液相中進行,稱為液相酶免疫分析。本試劑盒屬固相酶免疫分析之一?;驹硎菍⒖扇苄钥乖ɑ蚩贵w)吸附在固相載體上,使免疫反應在固相支持物上進行。再結(jié)合酶標記抗體(或抗原),利用檢測酶分解底物的量的差異來定量檢測相應的抗原(或抗體)。此法的基本要求是:1.抗原或抗體能牢固吸附于固相載體的表面且保持其免疫活性;2.抗原或抗體與酶連接所形成的結(jié)合物應既有免疫學特異性又具有酶活性;3.底物被酶分解,形成可溶性穩(wěn)定的有色產(chǎn)物。測定抗體時,將抗原吸附到固相載體上,然后與檢測樣品中的抗體反應,在固相載體上形成抗原抗體復合物,再與酶標記的抗體(抗免疫球蛋白)反應,檢測樣品中與抗原結(jié)合的抗體,底物被酶分解,出現(xiàn)顏色反應,其顯色的深淺與樣品中相應抗體量成正比。測定抗原時,先將特異性抗體吸附于固相載體,加入待檢抗原后,再用酶標記的抗體(與吸附在固相載體上的抗體相同)檢測樣品中的抗原,加入底物所出現(xiàn)的顏色改變與待測的抗原量成正比。
Rota-Elisa試劑盒采用直接法elisa,其簡單流程如下:
1、輪狀病毒IgG(抗體)包被,洗。
2、加待檢糞樣(抗原),洗。
3、加輪狀病毒IgG-酶結(jié)合物,洗。
4、加底物。
5、終止反應,判定結(jié)果。
結(jié)果判定
準確的判斷應使用分光光度計,光密度值越大,則陽性反應越強。待檢標本的判定以P/N比值計算:
P/N=(待檢標本光密度值-空白底物對照光密度值) / (陰性標本對照光密度值-空白底物對照光密度值)
P/N比值大于3.0,待檢標本為陽性;P/N比值為2.0-3.0,待檢標本為可疑;P/N比值小于2.0,待檢標本為陰性。