前胃泌素在人胃癌BGC-823細胞的懸浮腫瘤球中的表達
牛 茜，楊愛軍，王晨昱，劉偉，李 敏
（730000蘭州，蘭州大學基礎(chǔ)醫(yī)學院病理學研究所，甘肅省新藥臨床前研究重點實驗室）
[摘要] 目的 研究人胃癌BGC-823腫瘤細胞系中是否存在懸浮生長的腫瘤球，檢測前胃泌素(progastrin，Pro-GRP)在腫瘤球中的表達。方法 取貼壁生長的BGC-823細胞，用有限稀釋法和無血清培養(yǎng)法培養(yǎng)，并利用軟瓊脂克隆形成實驗證實BGC-823中存在懸浮生長的具有干細胞特性的腫瘤球，流式細胞儀（FCM）檢測該腫瘤球中ABCG2、CD44、CD166的表達。ELISA、細胞免疫熒光、FCM方法比較血清Pro-GRP分別在腫瘤球和貼壁細胞中的表達差異。結(jié)果 有限稀釋法和無血清培養(yǎng)法均在BGC-823細胞系中培養(yǎng)出了懸浮生長的腫瘤球；克隆形成能力顯示：腫瘤球為（37.63±5.99），貼壁細胞為（10.75±3.37），二者間有統(tǒng)計學差異（P=0.007） ...
[材料與方法] 人胃癌細胞系BGC-823為本實驗室保存。DMEM/F12細胞培養(yǎng)液（Gbico公司），胎牛血清(杭州四季青公司)、B27、表皮生長因子( epidermal growth factor，EGF)、堿性成纖維細胞生長因子( basic fibroblast growth factor, bFGF) ( Gibico[寫錯了，多寫了 一個字母i]公司)、胰島素( 江蘇萬邦公司)、100U/ml青霉素、80 mg/ml鏈霉素、L-谷氨酰胺(Sigma)，胰蛋白酶(武漢博士德公司)。ABCG2[第一次出現(xiàn)請注明中英文全稱]兔抗人mAb，Pro-GRP兔抗人mAb（上海藍基生物科技有限公司），F(xiàn)ITC標記山羊抗兔，DAPI/PI（武漢博士德公司），Pro-GRP-ELISA試劑盒（上海江萊生物科技有限公司[1]），F(xiàn)ACS Aria 型流式細胞儀(BD公司)，倒置相差熒光顯微鏡（尼康公司）。
[備注] [1]“江萊生物”10年以來一直致力于免疫學技術(shù)的積累與沉淀，目前江萊生物實驗室占地約3000平米，技術(shù)研發(fā)團隊50余人，配備了全球最先進的分析和檢測設(shè)備，我們通過自主創(chuàng)新以及與國內(nèi)外的科研單位合作研發(fā)，不斷突破新技術(shù)，目前我們研發(fā)了上千種指標，質(zhì)量成熟，并長期出口到歐美市場，贏得了眾多科研機構(gòu)的認可 ...
