丹參酮 ⅡA 對急性心肌缺血大鼠 S100A1 蛋白表達(dá)的影響

吳茂林、翟昌林、張亞梅、吳飛飛、張英志
（1. 浙江蕭山醫(yī)院心內(nèi)科，浙江 杭州 311200 ；2. 嘉興市第一醫(yī)院心內(nèi)科，浙江 嘉興 314000）

[摘 要] 目的 探討丹參酮ⅡA 對大鼠急性心肌缺血損傷后 S100A1 蛋白表達(dá)的影響。方法 選擇Wistar 大鼠 60 只，按隨機(jī)數(shù)字表法分為假手術(shù)組、急性心肌缺血模型組、丹參酮ⅡA 預(yù)處理組。采用左冠狀動(dòng)脈（冠脈）前降支根部穿線結(jié)扎的方法建立大鼠急性心肌缺血模型；假手術(shù)組僅開胸于大鼠左冠脈前降支根部穿線但不結(jié)扎；丹參酮ⅡA 預(yù)處理組于術(shù)前 3 d 腹腔注射丹參酮ⅡA 注射液（劑量為 1.5 mg/kg），假手術(shù)組和急性心肌缺血模型組以等體積生理鹽水腹腔注射。采用原位末端缺刻標(biāo)記法（TUNEL）檢測心肌細(xì)胞凋亡情況；檢測血清超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、肌酸激酶（CK）、乳酸脫氫酶（LDH）及 S100A1 蛋白水平；采用免疫組化染色和蛋白質(zhì)免疫印跡試驗(yàn)（Western Blot）檢測心肌組織 S100A1 蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果 與假手術(shù)組比較，心肌缺血模型組和丹參酮ⅡA 預(yù)處理組心肌細(xì)胞凋亡率及 MDA、CK、LDH、S100A1 表達(dá)水平均明顯升高，SOD 活性明顯降低 ...

[實(shí)驗(yàn)材料與藥品] 丹參酮ⅡA 注射液購自雅安三九藥業(yè)有限公司，批號：121011，每支 2 mL。超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）檢測試盒，人乳酸脫氫酶（LDH）檢測試劑盒，人肌酸激酶（CK）檢測試劑盒，蛋白酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測試劑盒購自上海江萊生物科技有限公司 [1]。原位末端缺刻標(biāo)記法（TUNEL）試劑盒購自美國Promega 公司，S100A1 和三磷酸甘油醛脫氫酶（GAPDH）抗體購自英國Abcam 公司。

[結(jié) 果] 心肌細(xì)胞凋亡：心肌缺血模型組和丹參酮ⅡA預(yù)處理組部分心肌細(xì)胞染色呈陽性（棕黃色），呈現(xiàn)形態(tài)不規(guī)則、與周圍組織脫離和核固縮等特征。假手術(shù)組大部分心肌細(xì)胞染色呈陰性。丹參酮ⅡA 預(yù)處理組細(xì)胞凋亡率明顯低于心肌缺血模型組，但兩組均明顯高于假手術(shù)組（P＜0.05）

免疫組化染色：與假手術(shù)組比較，心肌缺血模型組和丹參酮ⅡA 預(yù)處理組 S100A1 蛋白染色較深，S100A1 表達(dá)水平升高。丹參酮ⅡA 預(yù)處理組陽性蛋白少于心肌缺血模型組，表明 S100A1表達(dá)水平低于心肌缺血模型組。

[參考文獻(xiàn)]
［1］ 李東婭，章曉梅，唐莉 . S100 蛋白與相關(guān)疾病［J］. 醫(yī)學(xué)研究雜志，2007，36（9）：95-97.
［2］ 李迎國，楊喜民，唐宗椿，等 . 黃芪注射液對急性重型顱腦損傷患者血清神經(jīng)元特異性烯醇化酶、髓鞘堿性蛋白和 S100 蛋白B 含量的影響［J］. 中國中西醫(yī)結(jié)合急救雜志，2007，14（6）：337-339.
［3］ Remppis A，Pleger ST，Most P，et al. S100A1 gene transfer ：a strategy to strengthen engineered cardiac grafts ［J］. J GeneMed，2004，6（4）：387-394.
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[備 注] [1]“江萊生物”10年以來一直致力于免疫學(xué)技術(shù)的積累與沉淀，目前江萊生物實(shí)驗(yàn)室占地約3000平米，技術(shù)研發(fā)團(tuán)隊(duì)50余人，配備了全球最先進(jìn)的分析和檢測設(shè)備，我們通過自主創(chuàng)新以及與國內(nèi)外的科研單位合作研發(fā)，不斷突破新技術(shù)，目前我們研發(fā)了上千種指標(biāo)，質(zhì)量成熟，并長期出口到歐美市場，贏得了眾多科研機(jī)構(gòu)的認(rèn)可 ...

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