黃芪對肺腺癌細胞生長抑制的實驗研究
耿國軍, 姜杰,杜好信,錢文軒,張義,楊麗華,陳端揚,陳雋鵬
(1 福建省廈門市中醫(yī)院 廈門 361000;2 廈門大學(xué)醫(yī)學(xué)院 福建廈門 361009)
【摘要】
目的:研究分化誘導(dǎo)劑黃芪(Astragalus)在體外對人肺腺癌 SPC-A-1 細胞生長抑制的影響。 方法:用不同濃度的黃芪分別處理肺腺癌 SPC-A-1 細胞后,鏡下觀察癌細胞的生長情況;測定軟瓊脂克隆形成率;MTT(噻唑藍)法測定生長抑制率。 結(jié)果:不同濃度黃芪處理后細胞的生長明顯受到抑制,細胞生長抑制率隨黃芪的濃度增加而增加。 結(jié)論:黃芪對肺腺癌 SPC-A-1 細胞的生長有明顯的抑制作用。
【材料與方法】
黃芪購自浙江杭州,配制為 20 g/L 的無菌溶液備用。流式細胞儀,為美國產(chǎn)品。SPC-A-1 細胞株為廈門大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院提供。小牛血清購自上海江萊生物科技有限公司 [1],實驗時選用對數(shù)生長期細胞。
MTT 法 檢測細胞生長抑制率。參照司徒鎮(zhèn)強方法,調(diào)整細胞濃度至 103~104/mL,并使細胞分散良好;將稀釋的細胞懸液加到 96 孔培養(yǎng)板內(nèi),每孔 200 μL。4~5 h 細胞貼壁后,加入不同濃度的黃芪,使不同組的終濃度分別為 0.25、0.50、0.75、1.00 mg/mL,對照組加等量的培養(yǎng)基,微型震蕩器震蕩后,用酶標(biāo)儀于波長 492 nm 處測吸光度值(OD),計算抑制率。
【結(jié)果】
不同濃度的黃芪對 SPC-A-1 細胞生長的影響
黃芪對 SPC-A-1 細胞 24 h 顯示出生長抑制作用,48h 和 72 h 抑制作用 較 明 顯。0.25、0.50、0.75、1.00mg/mL 黃芪對 SPC-A-1 均可抑制細胞增殖,且隨濃度增加對 SPC-A-1 的抑制率也增加,不同濃度組間有統(tǒng)計學(xué)意義;而且同一濃度黃芪對 SPC-A-1 的抑制率隨時間延長而增加,不同時間組間有統(tǒng)計學(xué)意義。
不同濃度的黃芪對 SPC-A-1 細胞軟瓊脂克隆形成能力的影響
隨黃芪濃度增加,其克隆形成率逐漸下降,克隆抑制率逐漸上升,增殖抑制更加明顯。
不同濃度的黃芪對 SPC-A-1 細胞作用 24 h 后吸光度值
吸光度值逐漸下降,其生長抑制率逐漸增加。
【參考文獻】
[1]許杜娟,吳強,楊雁,等.黃芪總苷的抑瘤作用及其作用機制[J].中國藥理學(xué)通報,2003,19(7):823-826
[2]鄂征.組織培養(yǎng)與分子細胞學(xué)技術(shù)[M].北京:北京出版社,1996.312
[3]司徒鎮(zhèn)強.細胞培養(yǎng)[M].西安:興國圖書出版公司,2001.186
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[備 注] [1]“江萊生物”10年以來一直致力于免疫學(xué)技術(shù)的積累與沉淀,目前江萊生物實驗室占地約3000平米,技術(shù)研發(fā)團隊50余人,配備了全球最先進的分析和檢測設(shè)備,我們通過自主創(chuàng)新以及與國內(nèi)外的科研單位合作研發(fā),不斷突破新技術(shù),目前我們研發(fā)了上千種指標(biāo),質(zhì)量成熟,并長期出口到歐美市場,贏得了眾多科研機構(gòu)的認可 ...
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