多種試驗結(jié)果已證實，熒光酶聯(lián)免疫救贖具有很高的敏感性，但是若掌握不好也可帶來很高的背景染色，可有多種因素影響到最終產(chǎn)物的酶結(jié)合位點的沉積，這是因為這個沉積過程是一種復(fù)雜的化學(xué)反應(yīng)和物理變化的綜合結(jié)果。在ELF的反應(yīng)過程中很容易形成假的熒光結(jié)晶，使FISH信號減弱，引起非特異性結(jié)晶沉積在組織細胞表面，造成背景信號，試驗結(jié)果證實，只要延長ELF的反應(yīng)時間，就可以避免背景染色。

熒光酶聯(lián)免疫技術(shù)避免背景染色的方法有3種。

1、商品化試劑盒內(nèi)提供一種延時試劑。

2、在顯色液中加入4%PVP。

3、顯色時間控制在15~30min內(nèi)。