抗-HCV就是丙型肝炎病毒抗體。HCV病毒體呈球形，直徑小于80nm（在肝細胞中為36～40nm，在血液中為36-62nm ），為單股正鏈RNA病毒，在核衣殼外包繞含脂質(zhì)的囊膜，囊膜上有剌突。

抗-HCV是目前應(yīng)用最廣泛的用于流行病學(xué)調(diào)查、臨床丙型肝炎病人的篩查和診斷的檢測項目。至今為止檢測抗-HCV的方法不斷改進。隨著方法的改進，敏感性和特異性逐漸提高。根據(jù)Elisa試劑盒中抗原組成成分的不同，目前已經(jīng)研制出三代的檢測試劑。第一代酶聯(lián)免疫(EIA)檢測方法首先建立了丙型肝炎的篩查和診斷方法，但其敏感性和特異性較差。1992年發(fā)明了第二代EIA的檢測方法，在試劑中增加了HCV的多肽片段，其靈敏度和特異性均有了明顯提高，在高危人群檢出丙型肝炎并經(jīng)分子生物學(xué)檢測證實其敏感性約95％。第三代試劑進一步提高了敏感性至97％，同時縮短了檢出時間。

近日，綿陽市紅十字中心血站研究人員發(fā)表論文，旨在用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）的雙抗原夾心法和間接法檢測抗-HCV，并對不同檢測方法的試劑進行評估。研究指出，雙抗原夾心法的抗-HCV ELISA試劑盒靈敏度和特異性均優(yōu)于間接法。該文發(fā)表在2014年第02期《成都醫(yī)學(xué)院學(xué)報》雜志上。

用1種雙抗原夾心法和4種間接法檢測抗-HCV血清盤和不同濃度的室內(nèi)質(zhì)控品，嚴格按試劑說明書在Xantus全自動加樣儀和FAME全自動酶免分析儀中進行檢測。

經(jīng)用不同的ELISA法檢測抗-HCV后，血清盤中陰性參考品符合率均為20/20，陽性參考品符合率均為20/20。雙抗原夾心法靈敏度高，0.05NCU/mL的室內(nèi)質(zhì)控品能完全檢測出來，間接法最低檢出為0.5NCU/mL，間接法的10個單試劑陽性標本用雙抗原夾心法和RIBA確認法檢測全部為陰性。

抗-HCV Elisa試劑盒對室溫的要求

ELISA試驗反應(yīng)需要一定的時間，才能進入平臺狀態(tài)，否則反應(yīng)不完全。時間的長短又與溫度的高低有關(guān)，所以實驗室室溫的變化會直接影響酶反應(yīng)進入孵箱后在37'℃時的反應(yīng)時間，而使Elisa試劑盒規(guī)定的孵育時間相對不足或延長，造成試驗結(jié)果不穩(wěn)定。據(jù)有關(guān)資料顯示，酶反應(yīng)板分別在4℃室溫和25℃室溫放入37℃的孵箱，可相差10rain的顯色時間。由此可見ELISA試劑盒反應(yīng)的溫度，時間對0D值進入平臺狀態(tài)的影響很明顯。

當室溫偏低時，顯色不充分，測定值S/CO值變小，易出現(xiàn)假陰性；當室溫過高時，顯色反應(yīng)迅速，試驗室工作人員很難掌握反應(yīng)最佳狀態(tài)，容易出現(xiàn)本底偏深，S/CO值增大，易出現(xiàn)假陽性。在Elisa試驗中一定要重視試驗室的溫度，盡量將室溫控制在18℃~25℃。對室溫的監(jiān)控室實驗室質(zhì)量系統(tǒng)的重要組成部分。并按要求將Elisa試劑盒從冷環(huán)境中取出置室溫平衡15~30min后，方能使用。只有這樣，才能減少由實驗室室溫的變化而導(dǎo)致的Elisa試劑盒試驗誤差，確保實驗結(jié)果的準確，可靠。