Elisa試劑盒中用ELISA檢測時(shí)(以檢測弓漿蟲IgM為例),用無特異抗體的血清稀釋陽性血清繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,選擇的稀釋度應(yīng)很容易區(qū)別陽性和陰影結(jié)果的稀釋度。每次試驗(yàn)均應(yīng)同時(shí)使用陰性對照血清,可選擇強(qiáng)陽性的血清作為標(biāo)準(zhǔn)對照血清,并可自己設(shè)定其為100單位(免疫酶單位-EIU)。這樣每次試驗(yàn)均參考陽性血清結(jié)果確定每份血清的相對抗體水平,其計(jì)算公式如下:標(biāo)本值-陰性對照值 陽性對照值-陰性對照值
抗體水平(樣本)=(標(biāo)準(zhǔn)值-陰性對照值)/(陽性對照值-陰性對照值)×100%EIU
用在450nm檢測的吸光度計(jì)算,最后的值為EIU。
如果國內(nèi)或國際上的標(biāo)準(zhǔn)抗體和檢測方法,那么所用的參考血清應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)血清對照實(shí)驗(yàn)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化,但如果所用的檢測方法不同,標(biāo)準(zhǔn)化時(shí)就存在差別,不同的方法檢測出的結(jié)果不能反映出參考血清和標(biāo)準(zhǔn)血清之間的差別。
自己制備的標(biāo)準(zhǔn)參考血清應(yīng)保證質(zhì)量,并要有足夠的血清,小量分裝存儲與-20℃,或凍干存儲。標(biāo)準(zhǔn)血清檢測的吸光度值應(yīng)保證在一定范圍內(nèi),以便檢測每次試驗(yàn)的吸光度值的變化。