一種夾心斑點酶聯(lián)免疫吸附試驗（Dot-ELISA）開發(fā)的犬瘟熱病毒（CDV）檢測試劑盒。56只懷疑有CD在血淋巴細(xì)胞和瞼結(jié)膜用斑點ELISA和酶聯(lián)免疫吸附樣品的CDV抗原檢測陽性率，分別為，91%（49／54）和81%（44／54）的細(xì)胞樣品和88%（28／32）和75%（24／32）的結(jié)膜樣本。犬瘟熱病毒的檢測限分別為10 ng / L 50μDot-ELISA和40 ng / L 50μELISA。斑點酶聯(lián)免疫吸附相對于電子顯微鏡的可靠性為96%，22的樣本：所有的21個樣本中，犬瘟熱病毒顆粒的電子顯微鏡觀察了用斑點ELISA陽性結(jié)果；以單顆粒物樣品中未觀察到產(chǎn)生假陽性結(jié)果，用斑點ELISA。結(jié)果表明Dot-ELISA開發(fā)可以作為一個可靠的快速診斷測試的CD疑似病例，也可用于該病的流行病學(xué)監(jiān)測

簡介

犬瘟熱（CD）是一種傳染性極強的疾病，影響所有年齡的狗。全球范圍內(nèi)它具有很高的發(fā)病率和死亡率。犬瘟熱病毒（CDV），副粘病毒科的一個成員，麻疹病毒屬，導(dǎo)致在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的急性全身性感染或慢性局限性和持續(xù)性感染。受感染的狗都在初始階段的疾病的犬瘟熱或癲癇樣抽搐的卡他性形式。由于病毒具有很強的傳染性和感染的死亡率很高，飼養(yǎng)狗患犬瘟熱病毒感染最嚴(yán)重的經(jīng)濟損失。

評估抗體狀態(tài)的血清學(xué)檢測已被用于臨床CD。然而，只有一個低的抗體反應(yīng)可以在最初的幾周后檢測到感染。此外，許多小狗與母源抗體和疫苗接種的狗可能有高滴度的中和抗體。因此，中和抗體的檢測是不完全可靠的診斷為CD，和更多的關(guān)注已支付的CDV抗原的檢測。檢測犬瘟熱病毒在受感染的狗是病毒分離的最可靠的方法；然而，該方法是費時和經(jīng)常不成功，當(dāng)感染不是在急性期。其他實驗室的工具，如染色包涵體和熒光抗體試驗，亞急性或慢性的情況下也產(chǎn)生負(fù)面的結(jié)果。酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）使用蛋白質(zhì)和單克隆抗體，免疫層析試驗，和免疫捕獲ELISA來檢測犬瘟熱病毒在細(xì)胞培養(yǎng)和臨床標(biāo)本。他們都有很高的特異性和敏感性；最近，通過逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)檢測CDV核衣殼蛋白基因（PCR）和實時定量PCR已被開發(fā)。這些方法只能在配備實驗室進(jìn)行?？焖?、靈敏的實驗室和現(xiàn)場的CDV感染診斷的測試CD控制是必不可少的。

夾心斑點ELISA（Dot-ELISA）是一個敏感和特異的檢測各種病毒抗原，具有廣泛的臨床診斷應(yīng)用技術(shù)。目的是建立一種快速、敏感的實驗室和現(xiàn)場的CDV感染的診斷測試。研究結(jié)果表明，基于斑點ELISA具有可靠性的效果，單克隆抗體，操作簡單，重現(xiàn)性好。