RGS4和D2受體信號(hào)通路相關(guān)分子在甲基苯丙胺依賴CPP大鼠紋狀體的表達(dá)變化

蒙國(guó)懿，何繁漪，隋念含，趙林波，洪仕君，邢豫明，趙永娜
（昆明醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院暨云南省天然藥物藥理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，法醫(yī)學(xué)院，昆明650500，云南；云南省公安廳禁毒處毒品技術(shù)公安部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，昆明650228，云南）

[摘  要]
目的：研究甲基苯丙滕（methamphetamine,METH）依賴條件性位直偏愛(ài)（conditioned place prefence, CPP）實(shí)驗(yàn)大鼠紋狀體 G 蛋白信號(hào)調(diào)節(jié)因子 4(regulator of G-protein signal 4, RGS4）和多巴胺 D2受體（dopamine receptor D2）信號(hào)通路相關(guān)分子的表達(dá)變化。方法：建立 METH 依賴 CPP 大鼠 1 周組、2 周組，應(yīng)用蛋白質(zhì)印跡（West&shy;ern blot）測(cè)定各組大鼠紋狀體 RGS4 和 D2、抑制性 G 蛋白 α 亞基（inhibitory G protein α-subunit, Gαi）、絲裂原激活的蛋白激酶（mitogen-actiyatd protein kinase, MAPK）蛋白表達(dá)的變化；應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzyme linked immunosorbent as&shy;say, ELISA）測(cè)定各組大鼠紋狀體環(huán)磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate, cAMP）含量的變化。結(jié)果：與生理鹽水對(duì)照組相比，METH 依賴 1 周組、2 周組大鼠在伴藥箱的平均停留時(shí)間明顯延長(zhǎng)（P<0.05）。與生理鹽水對(duì)照組相比，RGS4 蛋白在 METH 依賴1周、2周組的表達(dá)均明顯下降(P<0.01），且與 METH 依賴 1 周組相比，2 周組的下降更為明顯（P<0.05）... ...

[藥品及主要試劑]
甲基苯丙臟藥片由合作單位云南省公安廳禁毒處毒品分析與禁毒技術(shù)公安部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室合法提供；水合氯醛，購(gòu)自天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司；BCA 蛋白濃度測(cè)定試劑盒，購(gòu)自北京天根生化公司；預(yù)染蛋自 maker0671，購(gòu)自Fermentas公司；ECL 化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑，購(gòu)自Thermo公司；一抗：鼠抗D2單克隆抗體，購(gòu)自美國(guó)abgent公司；兔抗Gαi 單克隆抗體，購(gòu)自由abcam公司；兔抗MAPK單克隆抗體，購(gòu)自美國(guó)Cell Signaling公司；兔抗RGS4多克隆抗體，購(gòu)自美國(guó) abgebt公司；兔抗自β－actin單克隆抗體，購(gòu)自美國(guó)SAB公司；二抗：HRP標(biāo)記的羊抗兔二抗，購(gòu)自美國(guó)Cell Signaling公司；HRP標(biāo)記的羊抗鼠二抗，購(gòu)自美國(guó)Cell Signaling公司；大鼠cAMP酶聯(lián)免疫分析試劑盒，購(gòu)自上海江萊生物公司 [1]... ...

[METH  依賴 CPP 大鼠缺狀體 RGS4、D2、Gαi、MAPK  蛋自表達(dá)的變化]
與生理鹽水對(duì)照組相比，METH  依賴 1 周組、2 周組 RGS4  蛋白表達(dá)均明顯下調(diào)（P<0.01）； 且與 METH  依賴 1 周組相比，2 周組的下調(diào)更為明顯 （P<0.05）。METH 依賴 CPP 大鼠紋狀體中 D2、Gαi 、MAPK 蛋白的表達(dá)，與生理鹽水對(duì)照組相比，METH 依賴 1 周組、2 周組 D2、Gαi 、MAPK 蛋白表達(dá)均明顯上調(diào)（P<0.01），且與 METH  依賴 1 周組相比，2 周組的上調(diào)更為明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)Fig.1

[參考文獻(xiàn)]
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[備 注] [1]“江萊生物”10年以來(lái)一直致力于免疫學(xué)技術(shù)的積累與沉淀，目前江萊生物實(shí)驗(yàn)室占地約3000平米，技術(shù)研發(fā)團(tuán)隊(duì)50余人，配備了全球最先進(jìn)的分析和檢測(cè)設(shè)備，我們通過(guò)自主創(chuàng)新以及與國(guó)內(nèi)外的科研單位合作研發(fā)，不斷突破新技術(shù)，目前我們研發(fā)了上千種指標(biāo)，質(zhì)量成熟，并長(zhǎng)期出口到歐美市場(chǎng)，贏得了眾多科研機(jī)構(gòu)的認(rèn)可 ...

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